桑尼CSIM共聚焦系统助力安徽医科大学王华教授团队在肝损伤研究领域取得新进展

近日，安徽医科大学第一附属医院王华教授团队在《Acta Pharmacologica Sinica》发表重要研究成果，相关工作以Hepatocyte cellular repressor of E1A-stimulated genes 1 protects against acetaminophen-induced liver injury by promoting autophagy为题。文章揭示了肝细胞中CREG1蛋白通过对自噬的调控在乙酰氨基酚（APAP）诱导的肝损伤（AILI）中的保护机制。该研究中，桑尼CSIM 130共聚焦系统在可视化与定量分析中发挥了关键作用，为机制的深入解析提供了强有力的技术支持。

研究背景和主要发现

乙酰氨基酚（APAP）过量是导致急性肝衰竭的主要原因之一，其肝毒性机制涉及线粒体损伤、氧化应激、炎症反应等多个方面。E1A刺激基因1的细胞抑制因子（CREG1）是一种分泌糖蛋白，在维持肝脏稳态中起着至关重要的作用。先前的研究表明，CREG1可减轻与多种肝脏疾病相关的肝损伤、脂肪变性和炎症。而自噬作为一种重要的细胞自我保护机制，在清除受损细胞器和有毒蛋白聚集体中起关键作用。

文章发现CREG1蛋白在AILI患者和小鼠模型中表达显著上调且肝细胞特异性敲除CREG1加重APAP诱导的肝损伤和炎症反应，后续研究表明CREG1通过激活AMPK促进自噬，清除APAP代谢产生的有毒物质；使用自噬诱导剂（如雷帕霉素）或AMPK激动剂（A769662）可逆转CREG1缺失带来的肝损伤。本研究首次发现CREG1在AILI中表达上调，并通过激活AMPK通路促进自噬，从而减轻肝损伤。

CSIM130共聚焦系统在文中的部分应用实例

1. 作者通过荧光评估了小鼠模型的肝细胞损伤。为了研究CREG 1在体内的作用，作者构建了肝细胞特异性Creg 1敲除小鼠（Creg 1Δhep小鼠）。通过成功的WB和qPCR实验确认了CREG 1在这些小鼠中成功缺失。随后作者用小鼠冷冻肝脏切片进行了受损细胞了TUNEL分析，在随后工作中也多次进行了该实验。

2. 作者通过SUNNY CSIM 130共聚焦系统在60倍油镜下观察自噬体（黄色斑点）和自噬溶酶体（红色斑点）的形成情况，直观反映自噬的强弱。为了研究CREG 1蛋白对体外自噬的影响，使用了原代肝细胞mRFP-GFP-LC 3报告基因作为载体，通过斑点形成评估自噬通量，描绘自噬体（黄色）和自噬溶酶体（红色）。结果表明，APAP处理的Creg 1敲除细胞表现出明显减少的细胞自噬（图d）。

总结

本研究首次揭示了CREG 1蛋白通过AMPK-自噬轴在AILI中发挥的保护作用，不仅为理解AILI的分子机制提供了新视角，也为临床治疗提供了潜在靶点。SUNNY CSIM 130共聚焦系统在TUNEL分析和自噬的动态监测与定量分析中发挥了不可替代的作用，显示了其在生命科学前沿研究中的广泛应用价值。